母乳中存在著許多生物活性蛋白質，在嬰兒的生長發育中發揮重要作用。其中，乳橋蛋白（lactopontin,LPN）是近幾年備受關注的一種。最初該蛋白在骨組織中被發現，被稱為骨橋蛋白（osteopontin,OPN），而后的研究表明，OPN具有兩種形式：分泌型OPN和細胞內OPN，來源于乳汁的OPN也被稱為乳源性骨橋蛋白，即LPN[1]。不同物種間的LPN存在結構相似性，其中人乳LPN和牛乳LPN的相同氨基酸位點比例為58.05%，而同為反芻動物的山羊LPN與牛LPN相同氨基酸位點比例則達到了90.84%，并且不同物種的LPN具有一致的整合素結合序列，因此可能具有相似的生物學活性。LPN與嬰兒的腸道、大腦和免疫發育有關[2-5]。中國營養保健食品協會嬰幼兒配方食品產業委員會按照循證醫學原則，選擇當前最佳證據，經反復修改討論，最終形成乳橋蛋白嬰幼兒健康效應科普文章。證據等級采用牛津循證醫學中心分級系統。

　　1 LPN的結構

　　LPN是一種高度磷酸化的O-糖基化酸性蛋白，不同物種的LPN間存在結構相似性，均包含可與整合素結合的谷氨酸-甘氨酸-天冬氨酸（Arg-Gly-Asp,RGD）序列、隱蔽基序（人:SVVYGLR，牛和山羊:SVAYGLK）以及一個CD44結合位點[6]。人乳、牛乳和山羊乳LPN分別含有298、262和261個氨基酸，如表1所示，人與牛中的LPN相同氨基酸位點比例為58.05%，相似氨基酸位點比例為19.80%；人乳與山羊乳LPN相同氨基酸位點比例為56.71%，相似氨基酸位點比例為19.13%；牛乳與山羊乳LPN相同氨基酸位點比例為90.84%，相似氨基酸位點比例為19.13%[7]。LPN中大多數修飾殘基是比較保守的。人乳LPN有34個磷酸絲氨酸位點、2個磷酸蘇氨酸位點和5個O-糖基化位點，磷酸化位點以3-5個磷酸殘基簇的形式出現，糖基化位點和RGD整合素結合基序沒有磷酸化[8]。牛LPN有27個磷酸絲氨酸位點、1個磷酸蘇氨酸位點和3個O-糖基化位點，其中有25個磷酸化位點和3個O-糖基化位點與人LPN相同。LPN的磷酸化和O-糖基化狀態可影響其與整合素和CD44受體的結合，從而影響其生物活性[9,10]。

表1人、牛、山羊乳橋蛋白序列相似性比較

　　2 LPN的含量及變化

　　乳汁的OPN含量明顯高于其他組織、細胞和體液，且人乳中其平均含量（138 mg/L）是牛乳的8倍（18 mg/L）[11]。人乳LPN含量在產后1-7天初乳中含量最高（178.0±17.9 mg/L），在8-14天的過渡乳中逐漸下降（134.8±18.5 mg/L），1個月后顯著下降（65.8±13.7 mg/L），直到哺乳后期保持穩定（12個月時為48.3±10.2 mg/L）[12]。Bruun等[13]檢測了629名來自中國、日本、韓國和丹麥四個國家哺乳期婦女乳汁的LPN含量，發現中國產婦母乳中LPN平均濃度（266.2 mg/L）明顯高于其他三個國家（韓國為216.2 mg/L，日本為185 mg/L，丹麥為99.7 mg/L），并且中國婦女母乳LPN占總乳蛋白的比例（2.7%）也高于韓國（1.8%）、日本（2.4%）和丹麥（1.3%）。Zhu等[14]檢測了131名分娩足月兒、中晚期早產兒（MPT，32-37周）、早產兒（VPT，28-32周）和超極早產兒（EPT，＜28周）的產婦在產后7、14、28和120天母乳樣本中LPN的濃度。結果顯示，VPT（P=0.024）和EPT（P=0.003）的產婦其母乳中LPN隨時間變化趨勢與足月奶有顯著差異。產后14天，VPT中LPN水平顯著高于足月兒母乳；產后28天，VPT和EPT組的母乳中LPN水平顯著高于足月兒的母乳。相關性分析發現母乳中的LPN濃度與產后28天嬰兒體重z分數（z-score）呈負相關，表明母乳中高水平LPN可能有助于早產兒在生命早期追趕生長。

　　3 LPN發揮健康效應的生物學機制

　　LPN通過防御病原感染、調節免疫反應以及細胞增殖和分化等發揮其免疫效應。由于LPN通常含有RGD序列、隱蔽基序和CD44結合位點，具有與αvβ2、αvβ3等整合素或CD44受體結合的特性，進而觸發信號通路顯現出多種生物活性[15,16]。LPN可以直接與入侵的病原體相互作用，與αvβ2整合素受體結合，誘導IL-1激活單核細胞遷移，增強吞噬作用[17]。動物實驗表明，缺乏編碼OPN的spp1基因的小鼠1型免疫功能嚴重受損，白細胞介素-12（IL-12）和干擾素-γ減少，IL-10增加，Th1/Th2免疫反應不平衡，更容易受到病毒和細菌感染[18]。

　　此外，LPN能促進腸道發育。體外研究表明，嬰兒通過乳汁攝入LPN后，有很大一部分LPN能抵抗胃液蛋白酶消化從而進入小腸發揮作用[19]。體內研究顯示，與母乳喂養的新生恒河猴性比，添加LPN配方奶喂養的猴子空腸轉錄組更相似。母乳喂養組和配方奶喂養組之間共有1017個基因表達存在差異，而在母乳喂養組和LPN配方奶組之間，只有217個基因表達存在顯著差異[20]。此外，LPN通過與整合素受體結合，調控與腸道增殖和免疫功能密切相關的基因表達[21]。M?ller等[22]以早產仔豬為實驗對象，與添加唾液酸或神經節苷脂配方奶粉相比，使用LPN配方奶粉喂養的仔豬壞死性小腸結腸炎的嚴重程度較低。

　　同時，LPN可促進大腦認知發育。一項關于仔豬大腦和認知發育的研究發現，添加牛LPN（250ml/L）的大豆蛋白配方與未添加相比，在新目標識別行為測試中并未表現出明顯差異，但添加LPN喂養仔豬在首次探索新目標的等待時間較短，大腦磁共振成像發現LPN可增加仔豬的胼胝體、側腦室、左右內囊、左右蒼白球、右海馬和右大腦皮質的體積[23]。OPN基因敲除的母鼠喂養喂養的小鼠較野生母鼠母乳喂養的小鼠的髓鞘相關蛋白的表達減少，NG-2膠質細胞向少突膠質細胞增殖和分化減少，并伴隨著ERK-1/2和P13K/Akt信號傳導減少，通過被動躲避測試和轉棒實驗發現記憶力和學習能力受損[24]。

　　4LPN與嬰幼兒免疫的相關證據

　　目前關于LPN嬰幼兒免疫的人群研究文獻主要為一項在中國開展的以牛乳LPN為干預物的雙盲、隨機對照實驗[25]，240名小于1月齡的健康新生兒隨機分配到標準配方奶粉組（F0組）、標準配方奶粉+65 mg/L牛乳LPN（F65組）和標準配方奶粉+130 mg/L牛乳LPN（F130組），干預6個月，同時招募了80名純母乳喂養的嬰兒作為母乳喂養組（BF組），評估LPN對嬰兒免疫發育情況[25]和炎癥[26]的影響。研究發現，與F0和F65組相比，F130組的T細胞比例增加，與BF組無顯著差異；與BF組相比，F65組和F130組的單核細胞比例增加；BF組單核細胞計數低于配方乳粉喂養組（P<0.0001）[25]。進一步分析血液樣本顯示F130組血漿中蘇氨酸顯著低于F0和F65組，血漿中支鏈氨基酸顯著低于F0組，但接近于BF組。添加了LPN的F65和F130組血清中腫瘤壞死因子α（tumor necrosis factorα，TNF-α）水平、嬰兒發熱頻率與BF組相似，且明顯低于F0組[26]。這表明，LPN可能對嬰兒免疫發育有利，添加量達到65mg/L時可觀察到作用，并且這種影響似乎是劑量依賴型增加。（證據級別1b）。

　　5小結與未來展望

　　LPN是一種在多種細胞、組織和體液中均有表達的多功能蛋白，其在乳汁中濃度最高，是母乳中重要的生物活性蛋白。現有臨床研究結果顯示，LPN在嬰幼兒生命早期免疫發育中顯示出一定的有益作用。此外，動物研究提示，LPN在腸道發育和神經系統發育中發揮特殊作用。但是，目前多數研究以體外和動物實驗為主，未來需要開展更多的臨床研究在證實LPN的作用。對于LPN嬰幼兒配方食品的產品應用，也還需要通過系列的科學評價體系，來獲得行業更多的認可。